В человеческой крови присутствуют групповые агглютиногены А и В и соответствующие агглютинины α и β, которые в качестве антител обозначаются как анти-А и анти-В. Разные сочетания таких свойств образуют, соответственно, 4 группы крови. Определить их можно разными способами, и один из них – перекрестный метод определения группы крови https://sangvitest.ru/perekrestnyj-metod-opredeleniya-gruppy-krovi/, который в сочетании с прямым методом предполагает использование одновременно стандартных сывороток и стандартных эритроцитов.
Специальное оснащение
Для проведения лабораторного исследования понадобятся реагенты, инструменты и другие материалы:
- в качестве реагента выступают стандартные эритроциты и изогемагглютинирующие сыворотки;
- 0,9-процентный раствор хлорида натрия;
- белые пластинки;
- инструменты для перемешивания жидкостей – чаще всего палочки из пластмассы и стекла;
- промаркированные для каждой группы реагентов пипетки;
- штативы, пробирки, карандаши для маркировки поверхности, часы.
Изогемагглютинирующие сыворотки помещены во флаконы с дозатором и промаркированы соответствующими цветами. Эритроциты поступают в лабораторию в консервированном виде. Но допустимо использовать и свежие нативные образцы, которые заготавливают малыми дозами.
Исследование
Методика перекрестного метода определения группы крови, используется, в том числе, когда с помощью применения стандартных сывороток (прямой метод типирования) агглютинация была невыраженной. Двойная реакция позволяет одновременно определять групповые агглютиногены в эритроцитах полученной от пациента крови (стандартными сыворотками), а также групповые агглютинины в составе сыворотки крови при помощи стандартных эритроцитов.
Венозная и капиллярная кровь заготавливается следующим образом: её набирают в сухую пробирку, центрифугируют, отстаивают полчаса, пипеткой набирают сыворотку, стараясь не задеть осадок эритроцитов на дне.
Затем выполняют исследование:
- слева направо маркируют пластинку, указывая специфичность тест-эритроцитов, а вверху – данные пациента, у которого взята кровь на исследование;
- в соответствии с маркировкой помещают по одной капле стандартных эритроцитов соответствующей специфичности: 0 (контроль), А и В;
- рядом помещают капли плазмы или сыворотки, отобранные пипеткой из пробирки с кровью пациента;
- аккуратно размешивают кровь и реагенты палочками, параллельно покачивая пластинку.
Результат нельзя расшифровывать ранее чем через 5 минут. Он считается достоверным, если агглютинация четко выражена, а также с учетом её отсутствия в контрольной лунке с эритроцитами 0.
Расшифровка:
- реакция с антигенами А и В – I группа;
- реакция с А – III группа;
- реакция с В – II группа;
- во всех лунках нет реакции – IV группа.
Метод называется перекрестным, потому что наличие агглютинации в определенных образцах крови при использовании эритроцитов должно совпасть с результатом, который был получен путем применения изогемагглютинирующих сывороток при прямом методе типирования. Идентичные итоги исследования должны указывать на содержание агглютининов и агглютиногенов, которые соответствуют одной группе крови пациента. Перекрестный метод – это обязательный этап исследования, который позволяет подтвердить результат, полученный при типировании крови прямым способом.